一、按检测场景分类

 

1.实时荧光定量PCR（qPCR）

 

应用场景：基因定量（如病毒载量、基因表达分析）、病原体检测（如新冠病毒）等。

 

周期：

 

样本制备：30分钟～2小时（核酸提取、纯化）。

 

上机检测：40分钟～1.5小时（仪器运行，完成40~50个循环）。

 

总周期：通常2~4小时（含前处理），自动化程度高的设备可缩短至1.5小时左右。

 

2.荧光免疫定量检测

 

应用场景：蛋白质定量（如肿瘤标志物、激素）、药物浓度监测等。

 

周期：

 

免疫反应：30分钟～2小时（抗原-抗体孵育，取决于反应温度和试剂盒设计）。

 

荧光检测：5~10分钟（上机读取荧光信号）。

 

总周期：1~3小时（手工操作流程较长，全自动设备可缩短至1小时内）。

 

3.细胞荧光定量分析（如流式细胞术）

 

应用场景：细胞计数、细胞表面标志物定量、细胞周期分析等。

 

周期：

 

样本染色：30分钟～1小时（荧光标记抗体孵育）。

 

上机检测：5~30分钟（取决于细胞浓度和检测参数数量）。

 

数据分析：10分钟～1小时（复杂分析需更久）。

 

总周期：1~3小时。

 

4.小分子荧光定量（如荧光探针法）

 

应用场景：环境污染物（如重金属、农药残留）、食品添加剂检测等。

 

周期：

 

样本前处理：1~4小时（萃取、纯化等，视基质复杂度而定）。

 

荧光检测：5~15分钟（直接测量或反应后测量）。

 

总周期：2~5小时（复杂样本如土壤、血液需更长前处理时间）。

 

二、影响检测周期的关键因素

 

样本前处理复杂度

 

简单样本（如血清、细胞裂解液）：前处理时间短（30分钟～1小时）。

 

复杂样本（如组织、粪便、环境样本）：需均质化、去杂质、浓缩等步骤，可能耗时2小时以上。

 

检测仪器自动化程度

 

全自动设备：如集成样本制备-检测的荧光定量PCR仪，总周期可压缩至1.5小时内。

 

手动/半自动化设备：需人工操作加样、孵育等步骤，周期延长至2~4小时。

 

荧光反应动力学

 

快速反应体系（如实时PCR）：检测阶段仅需数十分钟。

 

慢反应体系（如某些免疫荧光）：需长时间孵育（如过夜），总周期可能超过12小时（但此类场景较少，多通过优化试剂缩短时间）。

 

多指标同时检测

 

单指标检测：周期较短（如单重qPCR）。

 

多重检测（如同时测10种病原体）：仪器运行时间增加，但前处理可同步进行，总周期延长约20%~50%。

 

总结

 

荧光定量检测的周期最短可控制在1小时内（如简单样本的快速免疫检测），复杂场景则需数小时。实际周期需结合具体实验设计、样本特性及设备性能综合判断，建议通过预实验优化流程或咨询仪器厂商获取针对性方案。