常见提示：

 

信号过低/过高、重复性差（dupl:NG）

 

曲线非线性、R²差、灵敏度异常（sens.e）

 

温度偏差、光路不稳、定位错误

 

把报错截图/文字保留，便于定位。

 

二、标准品本身排查（80%问题在这里）

 

有效期与储存

 

确认未过期、避光/–20℃保存、未反复冻融（≤2–3次）。

 

开瓶/复溶后是否超过使用期（通常1–7天，看说明书）。

 

复溶与稀释是否规范

 

必须用说明书指定缓冲液/溶剂，不要用纯水或PBS替代。

 

轻弹+低速涡旋，完全溶解、无颗粒；避免剧烈震荡导致气泡/变性。

 

稀释时梯度准确、每步充分混匀；移液枪校准、吸头匹配。

 

是否降解/污染

 

外观：浑浊、沉淀、变色→直接换新标准品。

 

蛋白类：可跑SDS-PAGE，看是否出现聚合/降解条带。

 

建议：直接换一瓶新批号标准品重新复溶校准，排除旧品问题。

 

三、操作与上机排查

 

环境条件

 

室温20–25℃、稳定无阳光直射、无强振动、无强电磁干扰。

 

仪器预热30min以上，温度平衡后再校准。

 

样品池/板/毛细管

 

清洁：用无尘棉签+99%异丙醇擦拭，去除指纹、蛋白残留、盐析；严禁裸手接触光学面。

 

干燥：擦拭后1–2min晾干，无酒精残留。

 

放置：位置正确、卡紧，无倾斜、无气泡；气泡会导致信号漂移/重复性差。

 

加样与定位

 

加样量准确、无气泡、无溢出；溢出会污染光路/传感器。

 

微孔板/样品架定位到位，无偏移、无卡顿。

 

校准程序参数

 

选择正确的标准品批号/类型、对应方法/通道。

 

温度梯度、波长、积分时间与标准品匹配。

 

四、仪器端排查（光路/温控/软件）

 

光路与光学元件

 

光源（如LED/氙灯）是否老化、闪烁、能量不稳；必要时更换。

 

滤光片、透镜、反光镜清洁无划痕、无霉点；用专用清洁工具。

 

检测器（荧光/紫外）基线是否平稳；做基线校准/暗电流校准。

 

温控系统

 

温度偏差>±0.5℃会导致稳定性偏差；运行温度校准/验证程序。

 

加热/冷却模块是否异常、传感器是否脏污/老化。

 

软件与通讯

 

重启软件+仪器，重新连接；检查USB/网线、驱动、固件版本。

 

恢复默认校准参数，重新下载方法文件。

 

五、处理顺序（从快到慢）

 

✅换新标准品→规范复溶稀释→重新校准（最常见解决）

 

✅清洁样品池/光学面→干燥→正确上样（无气泡）

 

✅环境恒温20–25℃→仪器预热30min→重做基线

 

✅检查光源/滤光片/检测器→温控校准

 

✅仍失败：联系厂家工程师，提供报错+校准日志+标准品信息

 

六、预防建议

 

标准品分装单次用量，避免反复冻融。

 

每次校准前必清洁光学部件+做基线。

 

定期（每周/每月）光路性能验证+温控校准。